人丙氨酸转氨酶谷丙转氨酶(ALTGPT).pdf

人丙氨酸转氨酶/谷丙转氨酶(ALT/GPT)
酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
产品编号：E0207h
存，但应避免反复冻融。

注：以上标本均应密封保存，4 保存应小于 1 周，-20 不应超过 1 个月，-80 不应超过 2
个月；标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

操作步骤
实验开始前，各试剂均应平衡至室温，试剂不能直接在 37 溶解；试剂或样品配制时，
均需充分混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样
品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1、 加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液 100 ，余孔分别加
标准品或待测样品 100 ，注意不要有气泡，加样 时将样品加于酶标板底部，尽量不触
及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37 温育 2 小时。为保证实验结果有效
性，每次实验请使用新的标准品溶液。
2、 弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液工作液 100 （临用前配制），酶标板加上
覆膜，37 温育 1 小时。
3、 弃去孔内液体，甩干，洗板 5 次，每次浸泡 1-2 分钟，大约 400 /每孔，甩干（也可轻
拍将孔内液体拍干）。
4、 每孔加底物溶液 90 ，酶标板加上覆膜 37 避光显色（反应时间控制在 15-30 分钟，当
标准孔的前 3-4 孔有明显的梯度蓝色，后 3-4 孔梯度不明显时，即可终止）。
5、 每孔加终止溶液 50 ，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物
液的加入顺序相同。
6、 立即用酶标仪在 450nm 波长测量各孔的光密度（ 值）。

注：
1、 试剂准备：所有试剂在使用前应平衡至室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。
实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2、 加样：加样或加试剂时，第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不
同的 “预温育”时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间（包括
标准品及所有样品）最好控制在 10 分钟内。推荐设置复孔进行实验。
3、 温育：为防止样品蒸发，实验时将加上盖或覆膜的酶标板置于湿盒内，以避免液体蒸发；
洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态；同时应严格遵守给
定的温