化学分析方法验证.ppt

化学分析方法验证
方法验证的目的
目的是判断采用的分析方法是否科学，合
理，是否有效控制产品的内在质量。
需要验证的检测项目

目的在与判定被分析物是目标化合物而非其他物质。
专属性
鉴别反应
应能与可能共存的物质或结构相似化合物区别
不含被分析的样品，以及结构相似或组分中的有关化合物均应呈负反应
专属性
含量测定和杂志测定
色谱法和其他方法：附带表性图谱说明专属性
表明各组分的位置，分离度是否符合要求
杂质或辅料可获得的情况下，试样中可加入杂志或辅料，考察测试结果是否受干扰
对于杂质测定也可相试样中加入一定量的杂质，考察杂质间是否得到分离
色谱峰纯度试验（二极管阵列，其他检测器，质谱）
专属性
破坏性试验
高温，高湿，光照，酸破坏，碱破坏，氧化破坏
注意观察降解产物生成情况，分离度是否符合要求
注意掌握破坏条件，应使主成分峰保留大约90%
检测限
在确定的实验条件下，被测物能被检测出的最低浓度或含量
目视法（直观评价，非仪器分析）
可用于非仪器分析方法，也可用于仪器分析方法，用已知浓度的被测物，试验出能被可靠的检测出的最低浓度或量
信噪比法
用于能显示基线噪音的分析方法（仪器分析方法），是把已知低浓度试样测出的信号与空白样品的信号进行比较，算出能被可靠的检测出的最低浓度或量，一般以信噪比3：1或2：1时的相应浓度或注入仪器的量确定检测
标准差法
定量限
被测定物质能被定量测定的最低量，结果仍具有一定准确度和精密度的要求。
目测法（直观评价，非仪器分析）
用已知浓度的被测物，试验出能被可靠的检测出符合准确度和精密度要求的最低浓度或量
信噪比法
一般以信噪比（S/N）为10：1时相应的浓度或注入仪器的量进行确定。
检测线和定量限试验时应注意
A： 应以实验中得到的浓度分析，而不能靠推算。
B:应以定量浓度限为依据确定对照溶液浓度（一般扩大20—50倍）
线性
线性是指再设计范围内，测试结果与试样中被测物浓度直接呈正比例关系的程度。
线性应在分析需要的范围内进行评价
一般以最小二乘法处理数据求的回归曲线的斜率来表示，必要时可对响应信号进行数字转换。
数据要求：至少需要五个浓度考察线性，需提供相关系数，Y截距，应列出回归方程数和线性图。
范围
范围是指达到一定精密度，准确度和线性条件下，测试方法是用的高，低限量浓度或量的区间。
范围应根据分析方法的具体应用和线性，准确度，精密度结果和要求确定。
原料药和制剂含量测定范围为80%-120%
制剂含量均匀度范围为70%-130%
杂质测定应为被测杂质限度的-20%到+20%
溶出度应为测定范围的-20%到+20%，释放度因规定了限度范围，应为下限的-20%到上线的+20%，例如缓释片1h<20%，7h>70%，则验证范围定为0-90%
耐用性
耐用性又称粗放度，是指测试条件稍有变动时，结果不受影响的承受程度。失衡连试验室和工作人员之间的正常情况下试验结果重现性的尺度，如方法易受分析条件的影响，或要求苛刻，应注明
典型的变动包括：

用不同时间段的样品和标准品溶液与新制的标准品溶液的对比结果来分析溶液的稳定性
，溶剂，次数，时间等
耐用性
：
流动相PH（-+）
流动相组成（有机相-+）
色谱柱(同一厂家三个批号，或两个不同厂家（同固定相和填充物，尺寸）)
温度（20-25摄氏度）和流速（-10%至+10%）
检测波长（-5nm至+5nm）
：
色谱住(同一厂家三个批号，或两个不同厂家（同固定相和填充物，尺寸）)
温度
流速
耐用性
如果测试条件要求苛刻，则建议在方法中予以写明。
检测项目和验证内容总结
中国药典
鉴别
杂质测定
杂志限度测定
含量
溶出度等
准确度
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+
-
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精密度--重复性
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精密度—中间精密度
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专属性
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检测限
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定量限
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线性
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范围
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耐用性
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分析方法验证注意要点
空白样
空白样是指