铜绿假单胞菌的耐药.ppt

铜绿假单胞菌耐药研究进展
第一页，共三十一页。
、病原学、临床意义
主要内容 - O/F -
动力 + - + - -
MAC平板生长 + + + +/- -
第十二页，共三十一页。
鉴定
初步鉴定
菌体形态 菌落特征 产色素 气味 氧化酶
最终鉴定
非发酵菌生化鉴定系统
API-NE试条
注意：实验室诊断应与临床表现相结合
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药物治疗
传统药物治疗
哌拉西林，替卡西林
头孢他啶，头孢哌***
哌拉西林/他唑巴坦
替卡西林/克拉维酸
头孢哌***舒巴坦
环丙沙星，左氧***沙星
多粘菌素类（多粘菌素类B、E）
新研发的抗假单胞菌药物
多利培南（Doripenem）
西他沙（sitafloxacin）
比阿培南（Biapenem）
铜绿假单胞菌对以下药物具有天然耐药性：
氨苄西林、阿莫西林、阿莫西林/克拉维酸、第一、二代头孢菌素、头孢噻肟、头孢曲松、萘啶酸和甲氧嘧啶等。
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耐药机制
第十五页，共三十一页。
耐药机制




（BF）的形成
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1. 外膜通透性障碍
抗生素通过两种途径进入细菌外膜，亲水性抗生素的孔蛋白通道和疏水性抗生素的脂质介导通道。如果这些通道改变或缺失，抗生素将不能进入细菌到达作用靶位，从而使细菌产生耐药性。
PA的外膜通透性极低，仅为大肠埃希菌的1%-8%，这是PA对多种抗生素天然耐药的重要原因之一。β内酰***类、四环素、***霉素、喹诺***类只能通过孔蛋白提供的水通道跨越外膜。
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1. 外膜通透性障碍
PA外膜蛋白中的OprC、OprD、OprE是小分子亲水性抗生素进入细菌的通道，OprF形成大孔通道。孔蛋白数量的减少或基因突变影响外膜对抗生素的通透性。
孔蛋白形成的通道部分具有特异性，如OprD2孔道是亚***培南选择性快速进入菌体的特异性通道，如果OprD2蛋白缺失或者表达减少是导致PA对亚***培南耐药的机制之一，但对美罗培南却无影响。
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1. 外膜通透性障碍
氨基糖苷类和多粘菌素E并不通过外膜孔蛋白进入细胞内，而是先粘附在外膜的脂多糖上，再促进自身被细菌摄入，干涉细菌核糖体蛋白质的合成，进而产生抗菌作用。OprH的过度表达可防碍氨基糖苷类和多粘菌素E的粘附作用，从而导致耐药，但是这种耐药形式尚未在临床菌株中广泛发现。
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外排泵由三部分组成：
①外膜蛋白：形成门通道，有利于底物通过外膜；
②膜融合蛋白或连结蛋白，连接内、外膜蛋白；
③内膜蛋白，为主要的泵出蛋白，具有识别底物的作用，但不具特异性。
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青霉素结合蛋白（penicilin binding proteins,PBPs）
PBPs数量、结构的改变导致其与抗生素亲和力降低，产生缓慢结合的PBPs或者诱导性PBPs增多均能导致PA对β内酰***类抗生素产生耐药。
◆ DNA解旋酶和拓扑异构酶Ⅳ位点改变
◆ 此外，二氢叶酸合成酶发生结构改变，可使磺***类药物的亲和力降低，从而引起对磺***类药物耐药；
◆ 氨基糖苷类抗生素的作用靶位16SrRNA发生基因突变也可导致PA对氨基糖苷类抗生素耐药。
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3. 产生灭活酶（ 氨基糖苷类修饰酶）
AMEs由质粒编码，可分为乙酰转移酶、磷酸转移酶和核苷酸转移酶三类。
氨基糖苷类修饰酶（AMEs）能将氨基糖苷类抗生素的游离氨基乙酰化，将游离羧基磷酸化、核苷化，使氨基糖苷类抗生素发生钝化，不易进入菌体内，也不易与细菌内靶位（核糖体30S亚基）结合，从而失去抑制蛋白质合成的能力，因此细菌在抗生素存在的情况下仍能存活。
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4. 产生灭活酶（ β内酰***酶BLA ）
超广谱β-内酰***酶（ESBLs）
金属β-内酰***酶（MBLs）
又称金属酶或碳青霉烯酶，MBLs通过半胱氨酸、组氨酸、天冬氨酸等活性位点的氨基酸与锌离子结合，锌再