RAGE基因Gly82Ser多态性与脑梗死相关性研究.pdf

青岛大学
硕士学位论文
RAGE基因Gly82Ser多态性与脑梗死相关性研究
姓名:高思山
申请学位级别:硕士
专业:病理生理学
指导教师:崔瑞耀

基因多态性与脑梗死的相关性研究摘要危害大,%~%的病人遗留瘫痪,失语等严重残疾。人们虽对以上危险因素高,是目前危害人类健康的三大疾病之一。国内外学者对脑血管病的影响因素进行了大量的研究,发现许多因素与脑血管病的发病有关,高血压、心脏病、糖尿针对脑梗死多因素致病的特点,、发展无关。高血压、心脏病、高血脂、糖尿病和高血压及糖尿病家族史是脑梗死的危险因素。非酶糖化终末产物受体基因;脑梗死;糖尿病;高血压;多态性研究生:高思山±砩硌背景脑血管病是危害人类健康的常见病,其发病率、患病率和死亡率都很病、吸烟、酗酒等为脑血管病的危险因素D怨K朗悄匝9懿″饕@嘈停进行了预防,但脑梗死发病率仍居高不下,因此,进一步探讨糖尿病合并脑梗死、高血压合并脑梗死和单纯脑梗死的发病原因,尤其是从基本水平探讨基因突变与这些疾病的发生发展的关系,具有重要意义。与糖尿病合并脑梗死、高血压合并脑梗死和单纯脑梗死的关系。性—姆椒╗,检测糖尿病合并脑梗死例,高血压合并脑梗死例,单纯性脑梗死例,健康人对照例汉族人基因外显子坏慊蛐推德屎偷任换蚱德省<觳庋L恰⒏视腿⒌ü檀肌⑿牡图,统计高血压、糖尿病病史和家族史。结果高血压合并脑梗死组病人基因杂合子基因型频率明显;糖尿病合并脑梗死组和单纯脑梗死组基因型珿琒和等位基因,⑿脑嗖⒏哐V⑻悄虿和高血压、,可能是高血压合并脑梗死病人的危险因素;基因的多态性关键词导师:崔瑞耀目的中文摘要
—英文摘要篟,.甌....甀’.琱琱琩,.,,.,,,甌産瑃,,..,;::;——
芴寤騁嗵杂肽怨K相关性研究把血管病理生理性变化的关系Ⅲ“”。近年来,研究发现基因的多态性与许多疾病当前,脑梗死已成为危害人类健康的常见病和多发病,其发病率、患病率、死亡率均较高,死亡率约占所有疾病死亡人数近%,是目前人类疾病的主要死亡原因之一。存活者中~%病人遗留瘫痪、失语等严重残疾,给社会和家庭带来沉重的负担。与此同时,糖尿病亦成为危害人类健康的重要疾病,糖尿病高血糖状态下,非酶糖化终末产物增高引起的微血管病理生理变化受到广泛关注,尤其微血管合并症,成为威胁病人健康的主要原因“⋯。有关在糖尿病慢性并发症中的作用甚为复杂,有闹苯踊ё饔茫与和氧化自由基的关系,以及与配体结合的相互作用,受体调节白细胞趋化,产生细胞因子,细胞增殖和基质增生等作用,都不能完全解释与的发生发展有关,但从基因水平探讨受体基因多态性与糖尿病合并脑梗死、高血压合并脑梗死和单纯性脑梗死的关系研究较少,尚无试验研究证实基因多态性与这些疾病有关。本试验应用聚合酶链反应~限制性片段方法对受体基因多态性与脑梗死的关系进行研究V饕Q芯磕谌菸#τ肞方法对目的基因扩增。槿【猜鲅L岢鯠。τ镁酆厦噶捶从σ幌拗菩云畏椒盖心康幕颉缬久盖心康幕虿铮谢蚍掷唷掌褪荽怼
牧戏椒材料方法根据年中华医学会第四届脑血管病会议修订的各类脑血管疾病诊断要点,选择人选病例,经和な捣夏怨K勒锒稀H搜《韵蟊瓯及门诊健康查体者,渲荼瓯救∽由窬诳艱库≡癫±抵国北方汉族人。酚一***一异戊醇、蛋白酶、酒精、琼糖胶等,试剂均达国产分析纯。离心机虾0餐た蒲б瞧鞒В转/,美国—琙妥贤夥治鲆上海康化生化仪器制造厂垂直和水平电泳槽虾8慈丈锸笛榧际跹芯砍,电子分析天平随机选定符合人选脑梗死诊断标准病人,于晨起抽取空腹静脉血鼓S诔檠5比∈币阅常温下痬离心种樱管中,存入一℃冰箱中。同时取猜鲅#抗凝剂,于当日小时内N孪/离心分钟,收集上清液,.崛≈芪а;蜃镈均为年轮虑嗟捍笱б窖г焊绞粢皆荷窬诳谱≡翰∪.饕J约模板上海生工生物工程公司瑃酆厦浮ι锕こ坦大连邢薰,.饕R瞧魃璞公司,虾L炱揭瞧鞒,电热恒温水浴箱虾R搅破餍灯叱В琀、,高压消毒柜,像机等中间白色层,置于管中,存入一℃冰箱中备用。①向置于白细胞层管内加人煜赴呀庖海/《·’,
’。由上海生工生物工程公司合成,符合实验标准要求。②弃去上清液,用三蒸水洗涤沉淀一次,胄分钟。④加入等体积ズ头右宦确乱灰煳齑蓟旌弦::,混匀,⑤吸取水相,加入等体积***仿一异戊醇混合液煸龋胄离心分钟。的淀液,置于一℃冰箱冷冻保存,备用。。用┰鲆美国欣┰龇┰龇从Τ绦虺跗谠け湫分钟,每个循环变性℃种樱嘶℃种樱鲅方崾嬷漳┭由分钟,待机自动降为;③弃去上清液,加入蛋白