乳酸菌分离制作酸奶的实验报告.docx

乳酸菌分离制作酸奶的实验报告.docx实****报告
实****名称 微生物课程实****br/>系 别 生物与化学项目系
年级专业 2018 级生物项目
学生姓名
乐一鸣 1040903054
溶化地 BCG牛乳培养基 , 立即放在桌上摇匀 , 冷却凝固后即成平板 .
②十倍稀释法
将检样充分摇匀后 , 用十倍稀释法稀释成
-1
-2
-3
-4
-5
各种稀释度地
10
、10
、 10
、10
、10
样品液 .
③分离
直接用接种环蘸取 10-4 、10-5 两个稀释度地试管中原液 , 在 BCG牛乳培养基琼脂平板上划线分离 , 每稀释度做两个平皿 . 置 40℃培养箱中培养 48h. 如出现圆形稍扁平地黄色菌落及周围培养基变为黄色者初步定为乳酸菌 . 结果与分析：
我们蘸取 10﹣5,10 ﹣4 两个稀释度同时接种到两个培养基时 , 发现传代后 , 只有一个培
养基上长出少量黄色菌落；
说明我们地检样浓度太低造成最后菌落太少 , 我们接下来都转而蘸取 10﹣ 1,10 ﹣ 2 两个稀释度地试管中原液 , 结果菌落比较多 .
鉴别
（ 1）配制脱脂乳试管培养基 , 分装试管 , 包扎 , 灭菌备用 .
脱脂乳试管培养基 成分： 20g脱脂奶粉 ,285ml 灭菌水 .
配制好地脱脂乳培养基分装到 15支试管中 .
<2）选取经初步鉴定地乳酸菌典型菌落 , 用接种环挑取转至脱脂乳试管中 ,40 ℃培养箱中培养 8～24h. 若牛乳出现凝固 , 无汽泡 , 呈酸性 , 涂片镜检细胞为杆状或链球状 <两种形状地菌种分别选入） , 革兰氏染色显阳性 , 则可将其连续传代 4～ 6 次, 最终选择出在 3～ 6h 能凝固地牛乳管 , 作菌种待用
革兰氏 (Gram>染色液
1．草酸铵结晶紫染液
A液：结晶紫 (crystal violet> 1g,95% 酒精 20ml
B液：草酸铵 (ammonium oxalate> 0 ．8g, 蒸馏水 80ml
混合 A、 B二液 , 静置 48小时后使用 .
2．卢戈氏 (Lugol> 碘液
碘片 1 ．0g, 碘化钾 2 ．0g, 蒸馏水 300ml
先将碘化钾溶解在少量水中 , 再将碘片溶解在碘化钾溶液中
3． 95%地酒精溶液 .
4．沙黄复染液

, 待碘全溶后

, 加足水分即成

.
沙黄 ,95% 地酒精 10ml, 蒸馏水
将沙黄溶于乙醇中 , 再用蒸馏水稀释

90ml
结果与分析：
我们挑取地乳酸菌微传代地第四代菌落 , 用了四小时就能凝乳 , 而且是黄色地菌落 . 进行革兰氏染色后 , 镜检结果革兰氏阳性菌 , 且全部为乳酸杆菌；
可能是奶粉中球菌地含量比较少 , 所以只分离出来杆