实验五蔗糖酶的活力测定实验目的:?掌握3,5二硝基水杨酸测定还原糖的原理和方法?掌握酶的活力测定及其计算方法实验原理:?蔗糖酶是一种水解酶,它催化蔗糖水解为等量的葡萄糖和果糖。?本实验利用3,5-二硝基水杨酸溶液与还原糖共热后被还原成棕红色的氨基化合物。在一定浓度范围内,还原糖的量与棕色物质颜色深浅程度成一定比例关系,可用分光光度计进行测定。?酶活力单位:在35℃,()%蔗糖溶液释放1 mg还原糖的酶量定义为一个活力单位(U)。试剂与器材?蔗糖酶溶液?5%的蔗糖溶液?DNS试剂(3,5二硝基水杨酸试剂)?1mg/ml的葡萄糖标准液试剂器材?微量移液器?移液管?刻度试管?水浴锅?分光光度计?比色杯?卫生纸操作步骤?,取出,..?以葡萄糖(mg)含量为横坐标,A540值为纵坐标,绘出工作曲线。制作工作曲线的注意事项?,~,否则,缩小或加大样品的稀释倍数,重测!?:向杯中加样品时,注意加样到比色杯的2/3处;如样品外溢,用卫生纸向一个方向擦至透明;测定样品时,从浓度低到高测定;测定完成后,一定用洗瓶中的蒸馏水洗干净,然后倒置在滤纸上吸干;任何情况下都不许把比色杯放在仪器盖上!
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