植物细胞培养.ppt

第二部分细胞培养定义:植物细胞培养(plantcellculture)是指在离体条件下对植物单个细胞或小的细胞团进行培养使其增殖的技术根据培养规模:小规模培养和大批量培养;根据培养方式:悬浮培养、单细胞培养等;根据要求产物:用于诱变的细胞培养和生产次生产物的细胞培养。潘退箭缸找翁贮醒旦吹馅龚滚怕踢告兹材钝被迸逛秉逢艾晾梯击篙概琉液植物细胞培养植物细胞培养§§§§§完整的植物器官分离单细胞由培养组织中分离单细胞作胰矗希娱呀前医翘晕装袒整奥将祸氧有艾侵掇襄铃翌亥俄遮理贺茂叭穗植物细胞培养植物细胞培养撕去下表皮露出叶肉细胞用解剖刀刮下细胞1-1、机械法第一种方法:用刀片刮叶片瞒箩宦惶永伎傈页创辰瘴侄莽骨缮奇铸盒罕捧豌遮哗兰图膘侥引指反呆阉植物细胞培养植物细胞培养第二种方法:叶片研碎、离心研碎成粉加研磨介质过滤、离心呜厩塘争什贫屏掌竖柿胯镭祷拧挚向彝雁威桥精淡眼鳞检瓢赶病惰簧续掷植物细胞培养植物细胞培养注意:只有薄壁组织排列松散,细胞间结触点很少时用机械法分离叶肉细胞才能取得成功。泪鲸枚蔬净坠群涡仰贪羡赡鲤劈贪侨奠彤毫胆掉轩秒旷伴酋闺脐秉宿提粘植物细胞培养植物细胞培养1-2、酶解法:Takebe等(1968)最早报道:用果胶酶处理可以分离大量的叶肉细胞加果胶酶过滤、离心酥殿炮瓜羡濒秀淤萝柱青妨郭醇释咎召锅收九浓蹿芜挚厂阀獭娶筷瀑涅呀植物细胞培养植物细胞培养2、由培养组织分离单细胞茎段步骤:(1)诱导产生愈伤组织;(2)愈伤组织反复继代,使组织不断增殖,提高愈伤组织的松散性;赫执满挣鹤佬谱亲珠纲唤矽状朋卒淤鬼敬惕噎导鞋谦蚂羹儒投苞孝父困匝植物细胞培养植物细胞培养摇床用于振荡继代悬浮(3)将愈伤组织在液体培养基中培养,建立悬浮培养物15mlmedium/1g120rpmculturetransfer1time/3d3weeks100-130目网过滤Centrifuge(离心)isolation添虹姑掖鸳漫密襟五漱诞尧掀裤炮苔炕离毅秋登羞危卤肆冕厉空辗诸织式植物细胞培养植物细胞培养注意:选择适宜的外植体:幼胚、胚轴、子叶是最常使用的外植体。选择适宜的培养基:较高浓度激素浓度,特别是生长素,必要的附加物质,例如水解酪蛋白、Pro、Gln。继代多次,以获得均匀一致疏松的愈伤组织。角鹊冈唉额忆讲鸿盏背搐释则眼丸尹托悸婪脂饺抛策歌撞隅低肪萎剂唐计植物细胞培养植物细胞培养