下载此文档

植物细胞培养.ppt


文档分类:高等教育 | 页数:约47页 举报非法文档有奖
1/47
下载提示
  • 1.该资料是网友上传的,本站提供全文预览,预览什么样,下载就什么样。
  • 2.下载该文档所得收入归上传者、原创者。
  • 3.下载的文档,不会出现我们的网址水印。
1/47 下载此文档
文档列表 文档介绍
植物细胞培养
现在学****的是第1页,共47页
植物细胞培养,即对植物器官或愈伤组织上分离的单细胞(或小细胞团)进行培养,形成单细胞无性系或再生植株的技术。
现在学****的是第2页,共47页
第一节 单细胞培养
一、定义
单细养,其方法是用注射器吸取一定量的含单细胞和小细胞团的悬浮培养物,并移到含有新鲜培养基的培养瓶里,继续进行培养。
1、成批培养法
现在学****的是第17页,共47页
细胞生长周期
延滞期
对数增长期
直线生长期
缓慢期
静止期
时间
细胞数目
现在学****的是第18页,共47页
(二)半连续培养
指每隔一定时间后倒出一半的悬浮液,并同时补充加入等量新鲜培养液。能重复地取得大量、均一的培养细胞,供生物研究之用。
现在学****的是第19页,共47页
是利用特制的培养容器进行大规模细胞培养的一种方式。 在培养过程中,以不断抽取悬浮培养物并注入等量新鲜培养基,使培养物不断得到养分补充,保持其恒定体积的培养。
(三)连续培养
现在学****的是第20页,共47页
1、连续培养的特点 (1)由于不断加入新鲜培养基,保证了养分的充分供应,不会出现悬浮培养物发生营养不足的现象。 (2)可在培养期间使细胞保持在对数生长期中。细胞增殖速度快。 (3)适于大规模工业化生产。
现在学****的是第21页,共47页
2、连续培养的种类 封闭式连续培养:系统中的细胞数目不断增加。 开放式连续培养:系统中的细胞密度保持恒定。
现在学****的是第22页,共47页
封闭型连续培养:在培养过程中,排除的旧培养基由加入的新鲜培养基进行补充,进出数量保持平衡,从而使培养系统中营养物质的含量总是超过细胞生长的需要。
悬浮在排除液中的细胞经机械方法收集后再放回培养系统中,因此在这样培养方式中,随着培养时间延长,细胞密度不断增加。
现在学****的是第23页,共47页
开放型连续培养:为了不使限制细胞生长的因子出现,创造一个稳定的细胞生长的环境,必须建立一套自动控制系统来调节培养基注入的数量和培养液的总体积。
在开放连续培养中,注入的新鲜培养液的容积与流出的培养液容积相等,其中细胞的密度也保持恒定,并通过调节流入和流出的速度,使细胞的生长速度一直保持在一个稳定状态,流出的细胞相当于培养系统中新细胞的增加数。
现在学****的是第24页,共47页
3、为了保持在开放连续培养中细胞增殖的稳定性,采取的控制方法: (1)浊度恒定法 (2)化学恒定法
现在学****的是第25页,共47页
三、悬浮细胞的继代
在悬浮培养中,为了保持一定的悬浮细胞增殖速度和增殖量,应定期做继代培养,最适的周期一般为1-2周。但实际所需的时间和接种量应视不同细胞系而定。
继代时间为1周的细胞系可用1:4的接种量,继代时间为2周的可用1:10的接种量。
现在学****的是第26页,共47页
在悬浮培养中,细胞刚进入静止期之初,细胞悬浮液达到最大量,就必须进行继代培养。因为处在静止期的细胞悬浮液保存时间太长会引起细胞的大量死亡和解体。
为了加速细胞增殖,有的甚至在对数生长期末就进行继代。
现在学****的是第27页,共47页
四、培养细胞的同步化
同步培养:在培养基中大多数细胞都能同时通过细胞周期的各个阶段,同步性的程度以百分百分数表示。
现在学****的是第28页,共47页
实现悬浮培养细胞同步化的方法:
1、饥饿法:先对细胞断绝供应一种进行细胞分裂所必需的营养成分或激素,使细胞停滞在G1期或G2期,经过一段时间的饥饿后,当重新在培养基中加入这种限制因子时,静止细胞就会同时进入分裂。
现在学****的是第29页,共47页
2、抑制法:使用DNA合成抑制剂,也可使细胞培养同步化。当细胞受到这些化学药物处理后,由于这些核苷酸类似物的存在阻止了DNA的合成,细胞周期只能进行到G1期,细胞都滞留在G1期和S期的边界,当把这些抑制剂除去后,细胞就进入同步分裂。
现在学****的是第30页,共47页
为了改善液体培养基中材料的通气状况,需进行培养基的不断振荡: (1)旋转培养 (2)往返振荡培养 (3)旋转振荡培养 (4)搅动振荡培养
五、培养基的振荡
现在学****的是第31页,共47页
1、培养基成分: N6,MS,B5适合单子叶植物细胞, MS,B5,LS,SL适合双子叶植物细胞。 条件培养基适合单细胞和低密度细胞培养。 需要硝态氮、铵态氮、无机磷浓度更高。
六、影响细胞培养的因素
现在学****的是第32页,共47页
2、细胞密度:培养基的成分和起始细胞密度对单细胞培养成败有影响。
起始密度:细胞培养最低的有效密度,即能使细胞分裂、增殖的最低接种量,低于这个密度细胞不能分裂,甚至很快解体死亡。
现在学****的是第33页,共47页
3、植物生长调节剂:细胞悬浮

植物细胞培养 来自淘豆网www.taodocs.com转载请标明出处.

相关文档 更多>>
非法内容举报中心
文档信息
  • 页数47
  • 收藏数0 收藏
  • 顶次数0
  • 上传人卓小妹
  • 文件大小2 MB
  • 时间2022-03-15