氨基酸的薄层层析实验报告.doc

氨基酸的薄层层析实验报告
氨基酸的薄层层析实验报告
氨基酸的薄层层析实验报告
生物化学实验报告
姓 名: XXX
学 号: XXXXXX
专业年级: 临床八年制 __
组 别: 第二实验室
实验名称
(Title of Experimetn)
氨基酸的薄层层析
实验日期
(Date of Experiment)
XX
实验地点(Lab No、)
第二实验室
合作者(Partner)
XXX
指导老师(Instructor)
XXXX
总分
(Total Score)
教师签名(Signature)
批改日期
(Date)
一、实验预****br/>1、0 实验目的
掌握薄层层析法的一般原理。
掌握氨基酸薄层层析法的基本操作技术。
掌握如何根据移动速率(Rf值)来鉴定被分离的物质(即氨基酸混合液)。
1、1 实验原理
1、1、1薄层层析原理:(就是色谱分析技术的一种)
一般就是将固体吸附剂涂布在平板上形成薄层作为固定相。当液相(展开溶剂)在固定相上流动时,由于吸附剂对不同氨基酸的吸附力不一样,不同氨基酸在展开溶剂中的溶解度不一样,点在薄板上的混合氨基酸样品随着展开剂的移动速率也不同,因而可以彼此分开。(即通过吸附-解吸-再吸附-再解吸的反复进行,而将样品各组分分离开来)
1、1、2、 氨基酸与茚三***的显色反应
茚三***水化后生成的水合茚三***在加热时被还原,此产物与氨基酸加热分解产生的氨结合,以及另一分子水合茚三***缩合生成蓝紫色化合物而使氨基酸斑点显色。
1、1、3基于相对迁移率Rf值判定混合氨基酸组分
氨基酸的薄层层析实验报告
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层析中,物质沿溶剂运动方向迁移的距离与溶液前沿的距离之比为Rf值。
即:
=
由于物质在一定溶剂中的分配系数就是一定的,故移动速率(Rf值)也就是恒定的,因此可以根据Rf值来鉴定被分离的物质。
1、2 实验材料
1、2、1实验样品
① 丙氨酸:称取丙氨酸溶于90%异丙醇溶液至。
②精氨酸:称取精氨酸溶于90%异丙醇溶液至。
③甘氨酸:称取甘氨酸溶于90%异丙醇溶液至。
④混合氨基酸溶液: 将丙氨酸、精氨酸、甘氨酸按等体积制成混
合溶液。(上述溶液已由老师提前制备完成)
1、2、2实验试剂
①吸附剂:硅胶G(C、P、)。
②粘合剂:羟***纤维素钠(CMCNa):取羟***纤维素钠溶于
蒸馏水中,煮沸,静置冷却,弃沉淀,去上清备用。
③展开溶剂:按80:10:10(V/V/V)混合正丁醇、冰醋酸及蒸馏水,临用前
配制。
④茚三***溶液:取茚三***(A、R、)溶于无水***(A、R、)至。
⑤展层-显色剂:按照10:1比例(V/V)混合展开剂与茚三***溶液。
1、2、3实验主要仪器与器材
①层析板(6cm15cm);②小烧杯;③量筒(10mL);④小尺子;⑤毛细玻璃管;
⑥层析缸;⑦烤箱;⑧天平;⑨药匙。
氨